分光光度計使用一段時間后，一般都會存在一定的波長誤差。誤差較小時只需調(diào)整波長刻度盤或波長計數(shù)器，就能使誤差減小到合格范圍內(nèi)；當(dāng)波長誤差較大時，則不能再簡單地運用上述方法進行調(diào)整。對于不同類型的分光光度計，由于單色器色散特性的不同，誤差校準(zhǔn)方法也有較大的區(qū)別。
在棱鏡型儀器波長的長波區(qū)和短波區(qū)，棱鏡變化同樣位置時，儀器長波區(qū)的波長變化值將大于短波區(qū)的波長變化值，即在調(diào)整儀器的波長校準(zhǔn)螺絲時，引起儀器波長變化的情況是非線性的。例如當(dāng)調(diào)波長校準(zhǔn)螺絲使儀器650nm處變化(7——8)nm時，此時儀器400nm處只會變化1nm左右。利用這一特性，當(dāng)儀器出現(xiàn)較大的非線性誤差時，就能將儀器波長誤差準(zhǔn)確而迅速地調(diào)整到合格范圍內(nèi)。
光柵的色散特性是線性的，光柵型儀器的波長誤差一般也是線性的，波長誤差的調(diào)整方法較為簡單，這里不作介紹。下面詳細(xì)介紹棱鏡型儀器波長誤差的調(diào)整方法。
方法1:短波區(qū)是負(fù)誤差，長波區(qū)是正誤差時的調(diào)整
例如:某721型儀器短波區(qū)用標(biāo)準(zhǔn)值為430.0nm的標(biāo)準(zhǔn)干涉濾光片檢定，Δλ1=-6nm。長波區(qū)用標(biāo)準(zhǔn)值為683.0nm的標(biāo)準(zhǔn)干涉濾光片檢定，Δλ2=10nm。打開儀器的上部蓋板，松開波長盤上的3個固定螺絲，將刻度盤向高波長方向移|Δλ1|-1=|-6|-1=5nm(注意:此時波長盤不能動，只是移動波長刻度盤位置)。即原波長指示為440.0nm，移動波長刻度盤后指示為445.0nm。然后緊固刻度盤上的3個螺絲，將儀器調(diào)到長波區(qū)標(biāo)準(zhǔn)濾光片的標(biāo)準(zhǔn)值683.0nm處。將683.0nm干涉濾光片放入光路，反時針調(diào)儀器左邊的波長校準(zhǔn)螺絲，使儀器透射比為zui大。再將430.0nm干涉濾光片放入光路，檢查儀器短波區(qū)波長誤差情況，若還是負(fù)誤差，再用上述方法繼續(xù)調(diào)整；若是正誤差，按下述方法2繼續(xù)調(diào)整。
方法2:短波區(qū)是正誤差，長波區(qū)是負(fù)誤差時的調(diào)整
例如:某721型儀器用上述干涉濾光片檢定后，Δλ1=7.0nm，Δλ2=-8.0nm。此時將儀器波長刻度盤向低波長方向移Δλ1-1=7-1=6nm，并緊固刻度盤。再將儀器波長調(diào)到683.0nm處，將683.0干涉濾光片放入光路，順時調(diào)儀器波長校準(zhǔn)螺絲，使儀器透射比為zui大，其他同方法1。
用方法1或方法2將儀器高低端波長誤差減小到±1nm后，(500——600)nm之間的波長誤差將不會很大。該方法適用于各種棱鏡型紫外分光光度計和可見分光光度計。讀者可根據(jù)平時的調(diào)修經(jīng)驗參考使用。
